Ein flüssiger Stamm ist ein Stamm, der mit flüssigem Kulturmedium kultiviert wird.Es bietet die Vorteile eines kurzen Stammproduktionszyklus, eines konstanten Bakterienalters, einer bequemen Inokulation, einer Eignung für die Fabrikproduktion usw.Es wurde von der Mehrheit der Erzeuger begrüßt.Zellschüttler （https://www.luoron.com/plastic-erlenmeyer-flask-with-vent-cap-2-product/） ist eine Art Verbrauchsmaterial, das bei der Kultivierung flüssiger Stämme benötigt wird.Folgende Punkte müssen in der Kultur beachtet werden:

1. Vorbereitung des Kulturmediums gemäß der Formel verschiedener Komponenten, in den Behälter geben, mit Wasser auflösen, in dreieckige Flaschen aufteilen, im Allgemeinen 250 ~ 300 ml Zellschüttelflasche 50 ml Kulturmedium,500-ml-Dreiecksflasche  （https://www.luoron.com/plastic-erlenmeyer-flask-with-vent-cap-2-product/）100 ml Kulturmedium, Baumwollstopfen, mit Zeitungspapier umwickelt;Kann auch aus 8 Schichten Gaze hergestellt werden, 8 cm x 8 cm großer Flaschenverschluss, außen mit braunem Papier versiegelt.
2. Für die Sterilisation wird im Allgemeinen die Autoklav-Sterilisationsmethode angewendet, die 121 °C und 30 Minuten erfordert.Nehmen Sie es heraus und kühlen Sie es auf etwa 30 °C ab.Legen Sie es zur Verwendung in den sterilen Raum oder in die Impfbox.
3. Je nach den Anforderungen des aseptischen Betriebs kann jede Flasche mit einem 2–3 cm2 großen Schrägstamm verbunden werden, und jeder Schrägstamm kann mit 4–5 Flaschen verbunden werden.Es ist besser, etwas Medium mit den hinzugefügten Stämmen mitzubringen, damit diese auf der Oberfläche des Mediums schwimmen können.Decken Sie nach der Beimpfung die Öffnung der Flasche mit der ursprünglich verschlossenen Gaze ab und binden Sie sie mit einer Schnur fest.
4. Die beimpfte Stammflasche kann zur Kultivierung in ein Schüttelbett gestellt oder 48 Stunden lang einer konstanten Temperatur von 24 bis 26 °C ausgesetzt werden. Anschließend kann eine Oszillationskultur durchgeführt werden, nachdem das aerogene Myzel in das Kulturmedium ausgedehnt wurde .Die Schwingungsfrequenz des hin- und hergehenden Schüttlers beträgt 80 bis 120 U/min und die des Rotationsschüttlers 150 bis 220 U/min.3 ~ 4d können im Schüttler kultiviert werden.Am Ende der Kultur erschien das Kulturmedium aufgrund unterschiedlicher Stämme in unterschiedlichen Farben, z. B. war das Kulturmedium für Austernpilze und Enoki-Pilze hellgelb;Pilz, Kulturmedium Ericius erinaceus war rotbraun und duftete nach Pilzen;Das Pilzkulturmedium ist braun, dick und süß.Das Kulturmedium kann nur dann für die Produktion oder weitere Expansionskultur verwendet werden, wenn das Trockengewicht des Myzels 10 g/L erreicht und der Durchmesser der Myzelpellets 1 bis 2 mm beträgt.
 
5. Produktion des sekundären flüssigen Stamms, Produktion des sekundären flüssigen Stammskulturmediums mit dem gleichen Niveau des flüssigen Stamms, der Kulturbehälter sollte größer sein, das Fassungsvermögen beträgt nicht mehr als 3500 ml.Nach der Sterilisation und Abkühlung wurden die fermentierten Primärflüssigkeitsstämme hineingegeben5L Zellschüttler（https://www.luoron.com/3l5l-high-efficiency-erlenmeyer-flask-product/）in einem Verhältnis von 5–10 % gemischt und auf einem Schüttler bei langsamer Geschwindigkeit kultiviert.Nach einer gewissen Zeit der oszillierenden Kultur können flüssige Stämme mit gleichmäßiger Verteilung der Mikrokügelchen und klarer Fermentationsflüssigkeit erhalten werden.
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass Sie bei der Verwendung eines Zellschüttlers zur Kultivierung flüssiger Stämme nach den oben genannten Methoden vorgehen und darauf achten, die Temperatur, die Schüttelfrequenz und andere Faktoren im Prozess zu kontrollieren, um den Kultureffekt sicherzustellen.
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