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Methode zur Entfernung von Zelltrümmern

Nach der mechanischen Lyse der Zellsuspension gibt es viele Zellfragmente.Wie entferne ich diese Fragmente?Werfen wir einen Blick auf die verschiedenen Ansätze:

1. Verdünnungsmethode anwenden.Wenn die Zellen verdünnt werden, können sie sich auch vermehren, sie werden immer zahlreicher und die Zelltrümmer werden entsprechend immer weniger.
2. Es gibt auch natürliche Besiedlung.Zellen setzen sich schneller ab als die meisten Fragmente: : Bewegen Sie die Zellsuspension in dieZentrifugenröhrchenWenn die meisten Zellen absinken, kann die obere Lösung abgesaugt und dann der Kulturlösung hinzugefügt werden, um die Zellen zu suspendieren.Diese Methode kann wiederholt angewendet werden, wobei Sie jedes Mal unter dem Mikroskop beobachten können, ob sie Ihren Anforderungen entspricht.
3. Zentrifuge mit niedriger Drehzahlkann Schmutz entfernen, im Allgemeinen 700 g, 5 Minuten
4. Beim ZentrifugierenReduzieren Sie unter der Voraussetzung, dass die Anzahl der Zellen ausreichend ist, die Zentrifugationszeit, z. B. 5 Minuten, 1000 U/min, statt 3 Minuten, 1000 U/min, und entfernen Sie den Überstand, da sich im Überstand im Allgemeinen Nekrose und Ablagerungen befinden!Dieser Vorgang muss nur einmal während des Waschvorgangs vor der Inkubation durchgeführt werden!

Obwohl es viele Möglichkeiten gibt, Zelltrümmer zu entfernen, werden Sie feststellen, dass die Zentrifugation eine der effizientesten Methoden ist!

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Und da pflanzliche Gewebe und Zellen Zellwände aus Zellulose, Hemizellulose und Pektin haben, ist es im Allgemeinen erforderlich, Quarzsand oder Glaspulver mit einer geeigneten Extraktionslösung zu mahlen oder mit Zellulase zu behandeln, um den Zweck zu erreichen.Die Fragmentierung von Bakterienzellen ist schwieriger, da das gesamte Skelett der Bakterienzellwand tatsächlich eine kovalente Bindung von zystischen Peptidoglycan-Makromolekülen ist, die sehr zäh ist.Zu den gängigen Methoden zum Aufbrechen von Bakterienzellwänden gehören Ultraschallzerkleinerung, Sandmahlung, Hochdruckextrusion oder Lysozymbehandlung.Nachdem das Gewebe und die Zellen aufgebrochen sind, wird der geeignete Puffer ausgewählt, um das gewünschte Protein zu extrahieren.Unlösliche Materialien wie Zellfragmente werden entferntZentrifugeoder Filtrierung.

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Zeitpunkt der Veröffentlichung: 24. Juli 2023